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點擊次數:15344 發布時間:2014/4/17 10:59:55
抗體的功能抗體的主要功能是與抗原(包括外來的和自身的)相結合,從而有效地清除侵入機體內的微生物、寄生蟲等異物,抗體(antibody)是一種應答抗原產生的、可與抗原特異性結合的蛋白質。每種抗體與特定的抗原決定基結合。這種結合可以使抗原失活,也可能無效但有時也會對機體造成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產生,對人體可造成危害
標記抗體技術
免疫標記技術是將一些既易測定又具有高度敏感性的物質標記到特異性抗原或抗體分子上,通過這些標記物的增強放大效應來顯示反應系統中抗原或抗體的性質與含量。常用的標記物包括熒光素、酶和放射性核素等,用這3種標記物進行標記的免疫檢測技術被稱為3大免疫標記技術。目前,使用的免疫標記物還有化學發光物質、鐵蛋白和膠體金等。
一、辣根過氧化物酶(HRP)標記抗體
a. 辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP )
HRP廣泛分布于植物界,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個同功酶組成,分子量為40,000,等電點為pH3~9,酶催化的*適PH因供氫體不同而稍有差異,但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下的硫酸銨溶液。HRP的輔基和酶蛋白吸收光譜分別為403nm和275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的純度。HRP的催化反應需要底物過氧化氫(H2O2)和供氫體(DH2)。供氫體多為無色的還原型染料,通過反應可生成有色的氧化型染料(D)。按與抗原結合后是否出現可見反應,可將其分為:在介質參與下出現可見結合反應的完全抗體,即通常所說的抗體,以及不出現可見反應,但能阻抑抗原與其相應的完全抗體結合的不完全抗體。
原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司