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點擊次數：15157 發布時間：2014/5/13 9:50:03
磷脂酰絲氨酸標準品性狀：磷脂酰絲氨酸，CAS 51446-62-9淡黃或黃色粉末，能乳化于水。不溶于乙醇、甲醇；溶于氯仿、石油醚。人工合成物僅溶于氯仿。
磷脂酰絲氨酸標準品用途：磷脂酰絲氨酸用于生化研究。磷脂化合物中的磷酸甘油酯類，是細胞膜組分，如人紅細胞膜上就有磷脂酰膽堿（占19%）、鞘磷脂（占8%）、磷脂酰乙醇胺（占16%）和磷脂酰絲氨酸（占10%）。并且只有后者在細胞膜上具有凈負電荷，有助于膜的不對稱性。還能活化已損傷表面凝血酶原。并與磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺在體內可互相轉化。
磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于細胞膜的內側，但在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中（圖3）。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力特異性結合。將Annexin-V進行熒光素（FITC、PE）或biotin標記，以標記了的Annexin-V作為熒光探針，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。
碘化丙啶（propidine iodide, PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。因此將Annexin-V與PI匹配使用，就可以將凋亡早晚期的細胞以及死細胞區分開來。
磷脂酰絲氨酸標準品方法：
1、懸浮細胞的染色：將正常培養和誘導凋亡的懸浮細胞（0.5~1×106）用PBS洗2次，加入100ul Binding Buffer和FITC標記的Annexin-V（20ug/ml）10ul,室溫避光30min,再加入PI（50ug/ml）5ul,避光反應5min后，加入400ul Binding Buffer，立即用FACScan進行流式細胞術定量檢測（一般不超過1h）， 同時以不加AnnexinV-FITC及PI的一管作為陰性對照。
2、貼壁培養的細胞染色：先用0.25%的胰酶消化，洗滌、染色和分析同懸浮細胞。
3、爬片細胞染色：同上，*后用熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡進行觀察。
原創作者：上海恒遠生物技術發展有限公司
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