能夠應(yīng)用ELISA 實(shí)驗(yàn)的樣本種類很多，有血清，血漿，細(xì)胞上清，細(xì)胞裂解液，尿液，關(guān)節(jié)滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；采集和處理的方式都不相同。下面就列出了BioTNT 收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻(xiàn)和試劑盒說明書，部分方法經(jīng)BioTNT 驗(yàn)證過，但有的方法并沒有實(shí)際操作過，所以，以下方法僅供參考。
一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存；
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無(wú)菌試管中；
2、 采血后室溫靜置1小時(shí)；
3、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/span>
2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；
-20℃下，可放置保存1個(gè)月；
-70℃下，可放置保存6個(gè)月；
5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。
大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的 ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w中可能含有含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。
二、ELISA實(shí)驗(yàn)中血漿的采集、處理和保存；
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無(wú)菌試管中；
2、 按1:9加入抗凝劑（EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉），30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；
3、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心5min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/span>
2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；
-20℃下，可放置保存1個(gè)月；
-70℃下，可放置保存6個(gè)月；
5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。 請(qǐng)注意指標(biāo)說明書上對(duì)于抗凝血?jiǎng)┦欠裼刑厥庖螅ㄗh使用EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。
注意事項(xiàng)：制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原干擾而造成假陽(yáng)性。
三、ELISA 實(shí)驗(yàn)中尿液的采集、處理和保存；
1、 采集尿液樣本500ul，加入無(wú)菌試管中；
2、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的樣本留上清，棄下面沉淀。
3、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/span>
2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；
-20℃下，可放置保存1個(gè)月；
-70℃下，可放置保存6個(gè)月；
4、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。
四、ELISA 實(shí)驗(yàn)中腦脊液的采集、處理和保存；
1、采集腦脊液樣本，加入無(wú)菌試管中；
2、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的樣本留上清，棄下面沉淀。
3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/span>
2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；
-20℃下，可放置保存1個(gè)月；
-70℃下，可放置保存6個(gè)月；
4、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。
五、ELISA 實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞上清液的采集、處理和保存；
1、采集細(xì)胞培養(yǎng)上清液500ul，加入無(wú)菌試管中；
2、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清
總訪問量：9088986 管理登錄
