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點擊次數(shù):14793 發(fā)布時間:2015/9/16 10:21:30
雖說ELISA檢測法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點,但是在實驗中或多或少會出現(xiàn)一些問題,復孔的稀釋也不例外,ELISA檢測試驗中的復孔稀釋的重要性你知道嗎?
近日,山西大學曾老師來電表明了自己的實驗疑惑:“設計ELISA復孔檢查時,是對同一個樣品作兩次稀釋,再分別加到板上的兩個孔,還是只稀釋一次,然后吸取兩次分別加到兩個孔?前者似乎把稀釋時的誤差也考慮到了,但做出來的結(jié)果兩個孔相關挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法?"
為了減小誤差,是先稀釋再加樣。而針對這位客戶所遇到的疑問,我公司技術人員是這樣解說的:
1. 前者測的是稀釋和移液的誤差,后者只有移液誤差。
2. 一般都是稀釋一次,分兩孔吧。同濃度的分復孔。
3. 由于是從同一原液稀釋,一般不考慮稀釋誤差(稀釋誤差是存在的),都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是一一稀釋,這樣可以使稀釋誤差減小)。
4. 復孔是為了排除移液體積,板的影響,以及其他系統(tǒng)誤差的,要求復孔的濃度是一致的。稀釋后分孔能滿足此要求,一一稀釋不能。
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