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培養基滅菌的方法

點擊次數:15139   發布時間:2015/9/25 9:40:45

什么是培養基滅菌?培養基滅菌的方法有哪些?今天上海恒遠與您共享培養基滅菌的方法。
一、熱滅菌的主要原理
1.微生物的熱阻
2.對數殘存定律
3.理論滅菌時間的計算
4.滅菌溫度的選擇
二、滅菌方法
1、高壓蒸汽滅菌:
高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養基在愛制備過程中混入各種雜菌,分裝后應立即滅菌,至少應在24h內完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下,溫度121℃時,滅菌15~30min即可。消毒時間不宜過長,也不能超過規定的壓力范圍,否則有機物質特別是維生素類物質就會在高溫下分解,失去營養作用,也會使培養基變質、變色,甚至難以凝固。 將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中,裝水量一般不超過瓶的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包扎封口,然后放入高壓鍋中滅菌后即為無菌水。 滅菌后的培養基可放到培養室中預培養3d,若無污染現象,則證明滅菌是徹底的,可以使用。暫時不用的培養基置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養基應在1周內用完,其他培養基*多也不要超過1個月。
2、過濾滅菌:一些植物生長調節劑及有機物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇熱容易分解,不能與培養基一起進行高溫滅菌,而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌。細菌過濾器與濾膜(孔徑0.45微米)使用之前要行高壓滅菌。過濾后的溶液要立即加入培養基中,若為液體培養基,可在培養基冷卻至30℃時加入;若為固體培養基,必須在培養基凝固之前(50-60℃)加入,振蕩使溶液與其他成分混合均勻。
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