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技術文章

微生物過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒實驗原理及注意事項

點擊次數:14965   發布時間:2015/11/12 9:58:57

*近咨詢微生物試劑盒的客戶還挺多的,在10月底的時候已經有好幾個客戶在我司訂購了幾個微生物elisa試劑盒,在訂購微生物試劑盒之前有的客戶問到實驗過程中應注意哪些問題,下面是我司錢經理為客戶提供的微生物試劑盒注意事項。
微生物過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中過氧化氫酶(CAT)水平。用純化的過氧化氫酶
(CAT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入過氧化氫酶(CAT),
再與HRP 標記的過氧化氫酶(CAT)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底
洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*
終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化氫酶(CAT)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長
下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中過氧化氫酶(CAT)濃度。
微生物過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請*后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。

原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司

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