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技術解析:ELISA實驗設置陰性、陽性和空白對照的重要作用

點擊次數：15092 發布時間：2016/6/7 9:43:04

ELISA檢測，要求嚴格按照試劑說明書要求，每次試驗、每塊扳上都要設置以下3項對照和用途下面我司技術為您詳細介紹ELISA實驗設置陰性、陽性和空白對照的作用：
1．空白對照：僅用稀釋液代替檢測樣本、用以觀測*終反應的顯色“本底"、并用于酶標儀消除、扣除“本底"，即：以本底為“零"讀取陽性、陰性對照孔和樣本檢測孔的吸光值（A）；或者，在計算陰性對照均值（NCx）、陽性對照均值（PCx）、樣本讀數的S/C.O.值時減去空白對照的本底吸光值。
2．陰性對照（品）：所謂陰性對照（品），應當是本項檢測試驗中采用與待撿物（樣品、人用試劑就是人的血清等）具有同源性和同質性，又不含有待檢物質，并能客觀比較和鑒別處理因素（血清免疫學試驗中有特異性抗原與抗體反應）之間的差異。
3．陽性對照（品）：
（1）陽性對照（品）的概念與要求：同陰性對照（品），只是采用“精選"的含有待檢物質的人血清制備而成。所謂“精選"，就是把收集的陽性人血清經過數種試驗進行“篩試"、把含有“干擾性物質"的血清剔除、不用，以避免出現“假陽性"干擾試驗結果。
（2）陽性對照（品）設置，也可區分為兩種類型與用途：
一是陽性對照主要用于評價該項試驗結果是否有效和試驗結果的穩定性與可比性。而所設的陽性對照的測量值不列入Cut off值計算、但是不可不做。如HBsAg、抗—HBs、HBeAg等。
二是陽性對照的設置，不僅用于評價試驗結果是否有效和試驗結果的穩定性與可比性，而且計入Cut off的計算。此時的Cut off值的含義是代表該標志物在健康（正常）人群中正常值范圍的上限。待檢樣本檢測值超過該上限（Cut off）時表示有診斷意義。

原創作者：上海恒遠生物技術發展有限公司