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這些個ELISA小竅門 再不收藏就沒有了!

點擊次數:14850   發布時間:2017/4/19 11:11:46

    掌握了實驗技巧之后,【elisa試劑盒實驗】入門新手學起來都會快的多。本篇文章中的小竅門包含了ELISA操作技巧、要求、方法等技術,上海恒遠技術員根據自身多年科研經驗,為大家整理出了這些個ELISA小竅門:
     
   
   1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
    2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
    3.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
    4.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
    5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
    6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
    7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
         
    8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
    9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。 
    10.ELISA洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
    11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是*后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 
    12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
    13.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
    14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
    15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
    16.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,吸取的量不夠準確。 
    17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
     
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原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司

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