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技術文章

ELISA新手操作實驗之前需要做哪些準備?

點擊次數:14848   發布時間:2018/3/21 11:02:07

    近些年來,ELISA方法發展很快,elisa試劑盒有著高特異性、靈敏性等優點,接觸ELISA實驗的科研檢測員也越來越多,那么ELISA新手操作實驗之前需要做哪些準備?
   
    ①標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備 份。短期內無法實驗者,注意低溫保存。
    ②備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。
    ③根據檢測標本數量確定所需試劑的量。
    ④按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。
    ⑤ 選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不 同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
    ⑥ ELISA實驗中為了確定*佳信號和背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體 (0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的 系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
    ⑦一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統 可在一定范圍內提高靈敏度。
    ⑧若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑 制過氧化物酶的活性。
    ⑨標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細 胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節 ,將凍干的細胞因子復溶。
    
恒遠產品優勢
1、簡便快捷:450nm酶標儀檢測,包含Elisa所需全部試劑和詳細操作說明,全部現貨。
2、品質卓越:原料精選知名品牌,經嚴格甄選,保障各批次批間穩定性和可重復性。
3、權威認可:已有超過380篇SCI文獻引用,兩次登上期刊Nature。
4、品種齊全:提供近200種常用試劑盒,能檢測人、大鼠、小鼠、猴和牛等多種屬。
5、暢銷全球:出口到歐美市場,受到全球科學家的關注。
6、使用廣泛:客戶遍及全國各地,包括中科院、北京生命科學研究院、北京大學、清華大學、復旦大學、華西醫科大學、北京師范大學、華中科技大學等著名高校及研究機構。

    相關ELISA實驗的準備,除了以上說明的之外,上海恒遠公司建議大家仔細閱讀說 明書,并確定試劑盒在有效期內容,按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積)。

原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司

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