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技術文章

四川師范大學汪老師與我司技術交流ELISA

點擊次數:14993   發布時間:2018/8/22 11:23:33

    在本月初的時候,四川師范大學汪老師在我公司訂購了兩個指標的進口elisa試劑盒,昨日汪老師來電給我公司業務員,表明出:實驗已經完畢,但是有一些相關實驗的小困擾。對這一問題,我司業務員時間為汪老師安排到了技術部人員與其交流ELISA實驗。

在這一實驗過程中,為什么必須設置復孔呢?

    其實這一問題,之前也有客戶問過的,為獲得更準確的實驗結果,強烈建議標準品及樣本進行復孔檢測,因為復孔檢測可以:
1. 計算平均值,確保實驗結果更準確;
2. 解決實驗中誤操作造成的跳孔現象;
3. 計算CV值,對實驗的操作和試劑盒的精密度進行評估。
    
    汪老師還特別問道:到什么時候終止進口ELISA試劑盒實驗的反應?

    我司技術人員說明出:本實驗*終需要酶催化底物顯色反應來完成,在*佳時間終止反應是ELISA實驗成功的重要因素。在HRP-TMB酶反應系統中,當濃度標準品顏色不再變深,倒數2-3個濃度標準品顏色開始有淺藍色時,便需要終止反應。上海恒遠技術人員說明出:“也可以根據濃度標準品孔在620nm的OD值來決定,OD620=0.9-0.95之間時即可終止”。
     
酶標儀讀數的時候必須選用雙波長是有什么原因呢?
因為:
1. 在使用酶標儀之前務必預熱10-15min,使測讀結果更穩定;
2. ELISA實驗采用雙波長測定吸光度,可以排除單波長檢測時的測定干擾。
一般采用波長作為參照波長,在參照波長下,檢測物的吸光值*小,檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收;因此,雙波長測定,可限度的消除指紋、雜質及不透光的物質對酶標儀讀數帶來的誤差,以保證實驗數據的準確度。
       
    這幾個問題解決之后,汪老師再一次夸贊我公司,并預定了我公司八月份即將上市的新產品進口ELISA試劑盒,備用于九月開學實驗使用,非常感謝四川師范大學對上海恒遠的支持!

原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司

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