我們調查了熱滅活對胎牛血清以及對其中不同細胞株生長能力的影響。通過比較11個不同細胞株,發現其中熱滅活對6 個細胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纖維細胞,MRC-5)的生長帶來負面影響,三個細胞株不受熱滅活的影響,而只有兩個細胞株,在熱滅活之后,細胞生長有輕微的改善。所以,在正常的操作下,熱滅活通常對細胞的生長沒有明顯的促進作用。
在正常操作下,熱滅活經常給血清產品帶來負面的影響,對血清的加熱經常導致血清中沉淀的產生,而導致的沉淀又常常被認為是微生物的污染。注意到這個現象之后,為了驗證污染的存在,或者促進沉淀的溶解,許多培養者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟,血清中的蛋白進步的析出,為了確信血清未被污染,進行的鏡檢,無菌培養試驗,和革蘭氏染色試驗更是浪費了實驗者大量的時間和精力。
總之,多數細胞培養中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。我們建議,對于那些對血清進行滅活的用戶,需要通過試驗來證實其必要性,確定滅活的適當條件;在滅活過程中,需要嚴格認真監測,并選擇個可重復的方案進行操作。
原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司