細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。要求工作環境清潔、空氣清新、干燥和無煙塵,下面來瞧瞧:微生物實驗室的環境要求吧。
一、合適的氣體環境
氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環,產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。
開放培養時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環境中。二氧化碳既是細胞代謝產物,也是細胞生長繁殖所需成分,它在細胞培養中的主要作用在于維持培養基的pH值。大多數細胞的適宜pH為7.2-7.4,偏離這一范圍對細胞培養將產生有害的影響.但細胞耐酸性比耐堿性大一些,在偏酸環境中更利于細胞生長。但有一些細胞也喜歡偏堿環境中生長,如成纖維細胞*適合pH是7.4-7.6.每種細胞都有其*適pH值。
二、培養器皿
器皿應選擇透明度好,無毒,利于細胞粘附和生長的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有:
1.液體儲存瓶;
2.培養瓶;
3.培養皿;
4.吸管;
5.離心管;
6.其它。
三、常用設施及設備
1.超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側流式、直流式、外流式。
2.無菌操作間:一般由更衣間,緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養箱,
離心機,倒置顯微鏡等,緩沖間可放置電冰箱,冷藏器及消毒好的無菌物品等。
3.操作間:普通培養箱,離心機,水浴鍋,定時鐘,普通天平及日常分析處理物。
4.洗刷消毒間:烤箱,消毒鍋,蒸餾水處理器及酸缸等。
5.分析間:顯微鏡,計算機及打印機等。
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