對于很多實驗新手來說,給
elisa試劑盒加樣往往都是很頭疼的問題。今天,上海恒遠就來為大家詳細介紹下ELISA試劑盒加樣的方法,各位實驗新手拿走不謝哦!
具體方法如下:
一、血清血漿
加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標本,稀釋量大時將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。
1. 血清標本應是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液。
2. 血漿標本,推薦用EDTA的方法收集若待測樣本不能及時檢測,標本收集后請分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融。
3. 血清標本不應添加任何防腐劑或抗凝劑。
4. 標本應清澈透明,檢測前樣本中如有懸浮物應通過離心去除。
5. 請勿使用溶血,高血脂或污染的標本檢測,否則結果將不準確。
二、組織勻漿液的樣本
要制備過程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內源性蛋白酶降解,造成檢測結果的值偏低。
因組織勻漿液的樣本蛋白種類多,含量豐富,實驗參照血清血漿標本的處理方法進行,否則就會影響實驗結果。具體是加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標本,需稀釋時,請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。因為目標蛋白不同,可能造成降解的蛋白類型可能不一樣,如果實驗前通過文獻確定用哪種蛋白酶抑制劑,有針對性加入,可節省抑制劑。如果查不到相關文獻,可采用組合抑制的辦法確保蛋白不易被降解。
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