脫氧核糖核酸的房屋設施的“實時”或聚合酶鏈反應動力學儀，美國應用生物系統模型7700序列檢測系統（熒光定量儀）。聚合酶鏈反應（聚合酶鏈反應）發生了革命性變化的檢測脫氧核糖核酸和核糖核酸。少為單拷貝一個特定序列可以具體擴增和檢測。理論上，有一個定量關系的起始靶序列和數量的產品在任何給定周期。在實踐中，雖然，這是一個共同的經驗復制反應產生不同數量的產品。發展實時定量聚合酶鏈反應消除了變異與傳統的定量聚合酶鏈反應，從而使常規和可靠的定量聚合酶鏈反應產品。該儀器，因此，現在提供了調查的能力以執行非常靈敏，準確，重現性測量基因表達水平。此外，該儀器可用于其他應用如病毒載量檢測，進行等位基因歧視研究，優化反應條件。

答：實時聚合酶鏈反應化學

實時系統的反應是提高探針為基礎的，而不是嵌入，產物的檢測。主要缺點嵌入的檢測擴增產物積累是具體的和非特異性產物產生信號。另一種方法，5 ＇核酸檢測，提供了一個實時檢測方法特異擴增產物。在放大過程中，退火的探針的靶序列，生成一個基板切割的5’核酸酶活性脫氧核糖核酸酶酶時，從上游引物延伸到該地區的探針。這依賴于聚合確保裂解探頭只發生如果目標序列的擴增。

發展的熒光探針，使得有可能消除后的聚合酶鏈反應分析處理探針降解。該探測器是一個寡核苷酸與記者熒光染料和染料附著劑。雖然探頭是完整的，靠近止渴大大減少所發出的熒光染料記者的örster共振能量轉移（共振）通過空間。探針的設計與合成已簡化的發現，適當的淬火觀察為探針，記者在5 ＇端和淬火在3 ＇端。

圖1圖所發生的熒光探針在延長階段的反應。如果靶序列，探針退火下游從一個入門網站，切割的5’核酸酶活性的脫氧核糖核酸酶作為引物延伸。該裂解探頭分開的記者染料止渴染料，增加染料記者信號。卵裂消除探針從目標鏈，使引物延伸繼續結束的模板鏈。因此，列入探頭不抑制整個反應過程。額外的記者染料分子被裂解從各自的探針每個周期的影響，增加了熒光強度成正比的擴增生產。

利用熒光探針在核酸結合染料，具體雜交探針和目標的要求產生的熒光信號。因此，熒光探針，特異性擴增由于mis-priming或引物二聚體工件不會產生信號。另一個優點是它們可以是熒光探針標記不同，區別記者染料。通過使用探針標記不同的記者，擴增不同的序列，可以發現在一個單一的反應。缺點是不同的熒光探針，探針必須綜合檢測不同序列。

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B .儀器儀表

踝臂指數棱鏡7700序列檢測系統是一個靈活的系統設計，充分利用的好處，熒光探針檢測。7700個系統有一個內置的thermalcycler和直接激光通過光纖電纜的96個樣本的威爾斯。熒光發射流經電纜攝像儀。因為每個照射順序，尺寸的陣列可用于光譜分辨率的熒光燈。因為這7700種儀器檢測整個熒光光譜，該系統能夠識別和量化每個樣品以及多熒光。該軟件分析數據，首先計算貢獻的每個組成部分染料的實驗譜。每一個記者的信號，然后除以熒光內部參考染料（火箭）為規范non-pcr相關熒光波動發生交叉或時間。使用這種內部參考染料，啟用的能力來區分流感