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公司新聞

點擊化學蛋白質熒光標記

閱讀次數:1337   發布時間:2013/7/24 8:44:38

基于基因編碼非天然氨基酸的光點擊化學蛋白質熒光標記具有以下的優點:1) 反應速率快(達到50 M-1s-1); 2) 光驅動的蛋白質時空分辨標記;3) 點擊化學反應引發的熒光基團生成,背景噪音低;4) 光點擊活性非天然氨基酸的蛋白質定點插入對蛋白質的結構影響小。所以,遺傳密碼子的擴展結合光點擊化學反應可以對目標蛋白進行精確定位,并可清晰展示其動態行為,這就能夠滿足微絲骨架動態組裝機制研究的需求。

該研究通過基因編碼的方法實現了AcrK在大腸桿菌和哺乳動物細胞中蛋白的特異性插入,并在365 nm紫外或405 nm激光激發下與四唑化合物進行點擊化學反應,實現了大腸桿菌細胞骨架蛋白FtsZ的活細胞熒光標記。同時在模式植物擬南芥中實現了基因密碼子的擴展,這為我們利用基因編碼非天然氨基酸結合光點擊反應研究植物微絲骨架的動態組裝機制奠定了基礎。

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